Waters氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒的維護和使用

I. 簡介

  制藥及食品和飼料行業(yè)中的許多應(yīng)用都需要進行氨基酸分析。沃特世提供多款游離氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品，用于氨基酸的定性和定量測定、方法開發(fā)以及AccQ•Tag™ Ultra或AccQ•Tag方法的故障排查。本維護和使用手冊詳細說明了上述標(biāo)準(zhǔn)品的使用方法。

  本產(chǎn)品僅供研究使用，無法用于診斷。

II. 復(fù)溶指南

配合紫外或熒光檢測儀器常規(guī)使用時，復(fù)溶方法如下：

細胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒（P/N：186009300）

1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（藍色樣品瓶）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。

2. 取250μL 0.1 M HCl，加入細胞培養(yǎng)補充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（白色樣品瓶）中，每種氨基酸濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。

3. 將250μL制備好的水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品加入細胞培養(yǎng)補充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。冷凍保存，該標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。

  注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標(biāo)準(zhǔn)品，請在旋渦混合時翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均溶解。

食品和飼料標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒（P/N：186009299）

1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（藍色樣品瓶 ）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。

2. 取250μL 0.1 M HCl，加入食品和飼料補充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（綠色樣品瓶 ）中，濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。

3. 將250μL制備好的水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品加入食品和飼料補充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。

  注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標(biāo)準(zhǔn)品，請在旋渦混合時翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均已溶解。

校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品制備示例

采用如下稀釋方案創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品系列。這將作為創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線的初始校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品儲備液。

1. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品7：500μM（胱氨酸250μM）- 50μg/mL（胱氨酸25μg/mL）

  首先將試劑盒內(nèi)的大樣品瓶和小樣品瓶復(fù)溶并合并，然后從裝有500 μL 500 μM 26種氨基酸（細胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品）或21種氨基酸（食品和飼料標(biāo)準(zhǔn)品）的樣品瓶開始操作。

2. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6：250 μM（胱氨酸125 μM）- 25 μg/mL（胱氨酸12.5 μg/mL）

  取215 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品7，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6樣品瓶中。加入215 μL 0.1 M HCl。混合。

3. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5：100 μM（胱氨酸50 μM）- 10 μg/mL（胱氨酸5 μg/mL）

  取150 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5樣品瓶中。加入225 μL 0.1 M HCl。混合。

4. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4：20 μM（胱氨酸10 μM）- 2 μg/mL（胱氨酸1 μg/mL）

  取93 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4樣品瓶中。加入372 μL 0.1 M HCl。混合。

5. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3：10 μM（胱氨酸5 μM）- 1 μg/mL（胱氨酸0.5 μg/mL）

  取182 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3樣品瓶中。加入182 μL 0.1 M HCl。混合。

6. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2：2.5 μM（胱氨酸1.25 μM）- 0.25 μg/mL（胱氨酸0.125 μg/mL）

  取84 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2樣品瓶中。加入252 μL 0.1 M HCl。混合。

7. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品1：0.5 μM（胱氨酸0.25 μM）- 0.05 μg/mL（胱氨酸0.025 μg/mL）

  取56 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品1樣品瓶中。加入224 μL 0.1 M HCl。混合。

正纈氨酸內(nèi)標(biāo)（P/N：186009301）

  取6 mL稀釋劑，加入內(nèi)標(biāo)（紅色樣品瓶）中，渦旋 混合10 s，濃度為250μM。

III. 儲存

  收貨后請核對試劑盒清單。如果包裝被打開、損壞，內(nèi)容物缺失或超出有效期，請勿使用本產(chǎn)品（如果適用）。如需訂購替換試劑盒或部件，請聯(lián)系當(dāng)?shù)氐匿N售代表。訂購時請?zhí)峁┧璁a(chǎn)品的產(chǎn)品部件號和批號。

*復(fù)溶后，細胞培養(yǎng)試劑盒中的谷氨酰胺會隨時間推移降解。如果復(fù)溶后冷凍保存，產(chǎn)品標(biāo)示的谷氨酰胺濃度在最長15天內(nèi)有效。